你是否曾因科學課題研究的需要而想要培養細菌?你是否曾覺得培養細菌非常有趣而萌生過動手培養細菌的念頭?也許你會覺得培養細菌很難實現,但其實培養細菌是件非常簡單的事情,你只需要準備一些營養瓊脂(一種獨特的、為細菌生長供給養料的物質)、一些無菌培養皿和細菌即可。接下來跟廣州邁志一起學習如何在
培養皿中養細菌吧!
一準備瓊脂。
瓊脂是用于培養細菌的果凍狀物質。它是從紅藻中提取來的、可為多種細菌提供豐富營養物質并保證細菌大量繁殖的養料。有些種類的瓊脂中添加了其他促進細菌繁殖的營養物質(例如羊血)。
實驗中最常用到的瓊脂是瓊脂粉,你只需在每個用來培養細菌的4英寸培養皿中加入1.2克(大約半茶勺)瓊脂粉即可。
在耐熱碗或隔熱杯中,加入半茶匙的瓊脂粉和60毫升(約1/4杯)的熱水,將其攪拌均勻。如果你打算培養多盤細菌,你可以用一定倍數的熱水按比例溶解瓊脂粉來作為細菌的培養基。
將碗放到微波爐中,加熱沸騰大約1分鐘,取出,待其冷卻至不在沸騰的狀態。
當溶液準備妥當后,瓊脂粉應當完全溶解,溶液整體呈清亮不渾濁的狀態。
待瓊脂粉溶液冷卻幾分鐘后再進行后續步驟。
二、準備培養皿。
培養皿是用透明玻璃或塑料制成的、用來培養細菌或細胞等的平底容器。培養皿由皿蓋和皿底組成,其中皿底可插入到皿蓋中。培養皿不僅可以防止外部污濁的空氣污染培養物,還能將細菌產生的廢氣排出去,從而保證細菌的繁殖擴增。
培養皿在使用前必須被完全消毒并保持無菌的狀態,否則會影響實驗的進行和結果。新買的培養皿一般是經過預處理的,都是無菌且被塑料密封包裝的。
打開培養皿的塑料包裝,取出培養皿。打開皿蓋,小心地將較熱的瓊脂溶液倒入培養皿中。倒入溶液的量只需覆蓋皿底,能形成一層培養基即可。
迅速蓋上皿蓋,以防空氣中的細菌污染培養基。將培養基冷卻30分鐘到2小時,直到瓊脂溶液冷卻并硬化成果凍狀。
將培養基冷藏保存。如果你不打算立刻用該培養基培養細菌,那么將其冷藏保存,待到實驗需要時再取出培養細菌。
將培養基放在冷藏冰箱中保存可以防止培養基中水分的蒸發(細菌需要潮濕的生長環境)。而且還能減緩瓊脂培養基表面變硬的速度,以防在接種細菌時菌體遭到物理撕扯破裂。
將培養皿儲存在冰箱里時,培養皿需要倒置。這樣可以防止冷凝在皿蓋上的水掉下來破壞細菌生長平面。
瓊脂培養基可冷藏數月。在你使用培養基之前,先將其從冷庫中取出,待其溫度到達室溫后再接種樣品。
培養細菌
將細菌接種到培養基中。一旦瓊脂培養基凝固成固體或冷藏的培養基恢復到室溫,接下來你就可以接種細菌了。接種細菌的方式有很多,你可以通過直接接觸接種或收集樣品接種等方式來完成。
直接接觸接種:直接接觸接觸就是用含有細菌的物體直接與培養基接觸,將細菌傳遞到培養基上。最普遍的方式就是將手指(洗手前或洗手后皆可)輕放在培養基上?;蛘?,你可以嘗試剪下一點指甲、一枚舊硬幣、一絲頭發或一滴牛奶放在培養基上。你可以開動你的想象力,放上任何合適的帶有細菌的物體。
收集樣品接種:你可以從任何表面收集細菌樣品,然后將其轉移到培養基上。該法中,你僅需要一些棉簽。你拿住棉簽一端,并用棉簽棉花那端沾取嘴巴里、門把手上、電腦鍵盤上或者遙控器按鈕等任何你能想到的物體表面的細菌。然后將其涂在沒有干裂的培養基表面。以上所取樣品的地方都垢藏了大量的細菌,將其接種培養幾天后,你就能看到有趣惡心的結果。
如果你愿意,你可以在一盤培養基上接種多個樣品。在接種前,你需要在皿底上標記分出四個部分。然后在每個部分接種一個樣品。
標記并封閉培養皿。當你接種完細菌后,你需要將皿蓋蓋上,并用膠布密封培養皿。
確保在每個培養皿的膠布上用馬克筆標注好細菌來源等信息,否則,幾日之后你將分不清培養細菌的來源。
你可以將培養皿放入拉鏈袋中,使其得到多層保護。這樣可以防止潛在有害菌群的侵入,還不影響培養結果的觀察。
將培養皿放置在溫暖避光的地方培養幾天。細菌的培養環境最好是溫暖避光的培養箱。記住在細菌培養的過程中,培養皿要倒置,這樣可以防止皿蓋的水滴不會滴到培養基上影響細菌的培養。
培養的最佳溫度是70到98華氏度(即20-37攝氏度)。如果你將培養皿放在溫度較低的環境中,細菌的生長速度就會減慢。
細菌的培養時間最好是4-6天,這樣能讓其得到充分繁殖生長。一旦細菌開始生長繁殖,你也許能聞到一股獨特的氣味。
記錄你的實驗結果。幾天后,你會發現每盤培養皿中都長滿了多種多樣、形態各異的微生物。
在實驗記錄本上記錄你觀察到的培養皿中的微生物。也許你能根據結果總結出哪里的細菌含量最高。
細菌最多的地方是你的嘴巴嗎?是門把手嗎?還是遙控器上的按鈕?相信最終的結果能讓你大吃一驚!
如果你愿意,你可以測量菌落生長的速度。你可以在皿底用馬克筆在菌落周圍畫圈。幾天后,你就能得到一組同心圓。你可以依據此觀察菌落的增長。
測試抗菌藥物的有效性。本實驗可被改變成一個有趣的實驗,就是在培養皿中加入抗菌劑(洗手液、肥皂等等)以測試抗菌劑的有效性。
當你將細菌接種在培養基上后,用一根棉棒取一滴洗手液、消毒皂或家用漂白劑,滴在樣品中間,然后按步驟培養細菌。
隨著細菌的繁殖,你能看到在你滴下抗菌劑的地方形成一圈或一環沒有細菌生長的區域。這就是所謂的“滅菌區”。
你可以通過對比滅菌區域的大小來比較殺菌劑的效率。被殺死的細菌越多,殺菌劑的效果越好。
細菌的安全處理
采取適當的安全措施。在你處理培養過細菌的培養皿之前,你需要采取適當的安全措施來保護自己。
盡管你培養的細菌大多無害,但是大菌落仍有一定的危險。所以在丟棄培養皿之前,你需要用家用漂白劑殺死細菌。
你需要帶橡膠手套、戴護目鏡以及穿著實驗服或圍裙以防漂白劑傷害你的雙手、眼睛和衣服。
將漂白劑倒入培養皿中。打開培養皿的皿蓋,向培養基上傾倒少量的漂白劑,使其殺死細菌。
小心不要將漂白劑撒到你的皮膚上,它會灼傷你的皮膚。
將無污染性的
培養皿設備扔到拉鏈塑料袋中,然后扔到垃圾箱中。